過氧化氫酶介紹
過氧化氫酶(catalase,CAT)普遍存在于植物組織中,是重要的保護酶之一,其作用是清除代謝中産生的H2O2,以避免H2O2積累對細胞的氧化破壞作用,因而其活性的高低與植物的抗逆性有關。
測定方法
紫外吸收法
H2O2對240nm波長的紫外光具有強吸收作用,CAT能催化H2O2分解成H2O和O2,因此在反應體系中加入CAT時會使反應液的吸光度(A240)随反應時間降低,根據A240的變化速率可計算出CAT的活性。
改良
比色測定法
過氧化氫酶(Catalase,CAT)廣泛存在于各種生物體内.在測定CAT 活性的衆多方法中,以紫外吸收測定法最為簡便,但樣品中應無在240nm 處有強吸收峰的雜質.Sinha 建立的測定方法可靠,不受樣品中蛋白等物質的幹擾,但操作和計算均較繁瑣,不适合大批樣品的測定。故使用比色測定法。
碘滴定法
CAT能催化H2O2分解成H2O和O2,其活性大小以一定時間内分解H2O2的量來表示。當反應體系中有過量H2O2存在時,酶與底物(H2O2)反應結束後,用碘量滴定法測定剩餘的H2O2。其測定原理是:在钼酸铵催化下,H2O2與KI反應,放出遊離I2,然後用Na2S2O3滴定碘。根據空白和測定二者滴定差值,即可計算出酶催化分解H2O2的量