索氏抽提法
原理
樣品用無水乙醚或石油醚等溶劑抽提後,蒸去溶劑所得的物質,在食品分析上稱為脂肪或粗脂肪。因為除脂肪外,還含色素及揮發油、蠟、樹脂等物,抽提法所測得的脂肪為遊離脂肪。極具市場發展潛力。
試劑
(1)無水乙醚或石油醚;
(2)海沙;同GB5009.3食品水分的測定方法。
儀器
索氏脂肪抽提器。
操作方法
(1)樣品處理
①固體樣品。精密稱取2-5g(可取測定水分後的樣品),必要時拌以海沙,全部移入濾紙筒内。(幹樣粉碎後過40目篩,肉絞兩次,一般樣品用組織搗碎機。)
②液體或半固體樣品:稱取5.0-10.0g,置于蒸發皿中,加入海沙約20g于沸水浴上蒸幹後,再于95---105℃幹燥,研細,全部移入濾紙筒内。蒸發皿及附有樣品的玻棒,均用沾有乙醚的脫脂棉擦淨,并将棉花放入濾紙筒内。
(2)抽提
将濾紙筒放入抽提管内,連接已幹燥至恒量的接受瓶,由抽提器冷凝管上端加入無水乙醚或石油醚至瓶内容積的2/3處,于水浴上加熱,使乙醚或石油醚不斷回流抽提,一般抽提6-12h。
(3)稱量
取下接受瓶,回收乙醚或石油醚,待接受瓶内乙醚剩1-2mL時在水浴上蒸幹,再于95--105℃幹燥2h,放幹燥器内冷卻0.5h,稱量。
計算
X=m1-m0/m2*100
式中:X---樣品中脂肪的含量,%m1---接受瓶和脂肪的質量,g;m0---接受瓶的質量,g;
m2---樣品的質量(如是測定水分後的樣品中,按測定水分前的質量計),g。
說明
(1)本法為索氏(SoxhLet)提取法,為經典方法,測定準确,但費時、費試劑。
(2)本法要求必須幹燥無水,水分有礙有機溶劑對樣品的浸潤。
(3)本法測得的脂肪中,還含有少量的可溶于脂肪的有機酸、色素、香精、醛、酮等,故隻可稱為粗脂肪。
(4)索氏提取器如圖3-7所示。有機溶劑在接受瓶中受熱蒸發至冷凝管中,冷凝後于盛裝樣品的提取筒中,當提取筒中溶劑達到虹吸管頂端時,自動虹吸入下面接受瓶中,接受瓶中溶劑受熱蒸發,于冷凝管中冷凝後入提取筒中,再次浸取樣品;如此循環,每一次提取筒中溶劑均為幹淨的重蒸溶劑,故相當于每一次都用新鮮溶劑萃取,從而提高提取效率。
(5)由于為易燃的有機溶劑,故應特别注意防火。
(6)本法主要測定食品中遊離脂肪的含量。
酸水解法
原理
樣品經酸水解後用乙醚提取,除去溶劑即得遊離及結合脂肪總量。
試劑
(1)鹽酸;
(2)95%乙醇;
(3)乙醚;
(4)石油醚(30-60℃沸程)。
儀器
100mL帶塞量筒。
操作方法
(1)樣品處理
①固體樣品。精密稱取約2.00g,置于50mL大試管内,加8mL水,混勻後再加10mL鹽酸。
②液體樣品。稱取10.0g,置于50mL大試管内,加10mL鹽酸。
(1)将試管放入70-80℃水浴中,每隔5-10min用玻棒攪拌一次,至樣品消化完全為止,約40-50min.
(2)取出試管,加入10mL乙醚,混合。冷卻後将混合物移入100mL帶塞量筒中,以25mL乙醚分次洗試管,一并倒入量筒中。待乙醚全部倒入量筒後,加塞振搖1min,小心開塞,放出氣體,再加塞塞好,靜置12min,小心開塞,并用石油醚-乙醚等量混合液沖洗塞及筒口附着的脂肪。靜置10-20min,待上部液體清晰,吸出上清液于已恒量的錐形瓶内,再加5mL乙醚于帶塞的量筒内,振搖,靜置後,仍将上層乙醚吸出,放入原錐形瓶内,将錐形瓶置水浴上蒸幹,置90-105℃烘箱中幹燥2h,取出,放幹燥器内冷卻0.5h後稱量。并重複以上操作至恒重。
計算
同索氏抽提法。
說明
(1)本法适用于各類食品中脂肪的測定,特别是同于樣品易吸濕、不易烘幹,不能使用索氏提取法時,本法效果較好。
(2)樣品加熱、加酸水解,可使結合脂肪遊離,故本法測定食品中的總脂肪,包括結合脂肪和遊離脂肪。
(3)水解時,注意防止水分大量損失,以免使酸度過高。
石油醚可使水層和醚層分離清晰。
(4)石油醚可使水層和醚層分離清晰。