演藝經曆
1985年，周慧敏參加了新秀歌唱大賽。1986年，她參加了“香港電台業餘DJ大賽”，并獲得了亞軍。1987年，周慧敏加入香港電台第二台擔任DJ，與歌手黃凱芹搭檔主持音樂節目《青春交響曲》。
1988年，周慧敏加入TVB，擔任音樂節目《勁歌金曲》的主持人；同年8月25日，與林子祥、鄭裕玲共同主演的愛情喜劇片《三人世界》上映，該片是周慧敏的電影處女作，她憑借該片獲得了第8屆香港電影金像獎最佳新演員提名；11月1日，推出個人首張同名EP唱片《周慧敏》，該唱片銷量獲得“金唱片”成績。
1989年1月，獲得香港電台第11屆十大中文金曲最有前途新人獎優異獎；同年，擔任香港電台電視部時事節目《摩登時代》的主持人。
1990年，與劉錫明、羅嘉良等聯袂主演的古裝武俠劇《烏金血劍》播出，該片是周慧敏出演的個人首部電視劇，她在劇中飾演活潑爽朗，好勝好強的“唐劍兒”；同年，推出個人首張音樂專輯《Vivian》，該專輯獲得了白金銷量。
1991年，周慧敏辭去電台工作，加盟寶麗金唱片公司，全線向歌唱和演戲發展；同年10月1日，推出音樂專輯《A Long and Lasting Love》，該專輯收錄包括主打曲《天荒愛未老》在内的10首歌曲，其中《天荒愛未老》被評為勁歌金曲第四季季選金曲。
1992年3月19日，與黎明、鄭則仕等合作主演的喜劇電影《癡情快婿》上映，她在片中飾演愛上反黑組警員的黑社會老大之女“馬青霞”；6月1日，推出音樂專輯《Endless Dream》，該專輯收錄包括《如果你知我苦衷》在内的10首歌曲；10月5日，與鄭少秋、劉青雲、劉松仁等共同主演的時裝商戰劇《大時代》首播，周慧敏扮演為人悭吝，卻煮得一手好菜的“阮梅” ；随後，周慧敏簽約台灣福茂唱片，進軍台灣市場，并于11月6日發行個人首張普通話唱片《流言》，該唱片總銷量沖破30萬張；同年，周慧敏被選為商業電台十大健康形象藝人。
1993年1月，周慧敏獲得了日本NHK最受歡迎外國女歌手獎；1月7日，發行粵語專輯《冬日浪漫》，該專輯包括同名主打歌在内的11首歌曲；2月26日，出演的喜劇電影《風塵三俠》上映；9月，發行粵語專輯《最愛》；同年，獲得勁爆女歌手大賞銅獎。
1994年，周慧敏先是在台灣舉行了4場巡回演唱會，接着又在香港舉行了4場“周慧敏美的化身94”演唱會；同年4月1日，發行粵語專輯《成長》；11月26日，與邵仲衡、郭耀明聯袂主演的愛情電影《我愛法拉利》上映，她在片中飾演一直夢想成為歌手的“周小敏”。
1995年5月15日，發行粵語專輯《多一點愛戀》，該專輯包括同名主打歌在内的12首歌曲；11月13日，與陳錦鴻、梁藝齡、譚耀文等聯合主演的民國愛情劇《刀馬旦》開播，她在劇中飾演為追查藏寶圖下落而潛入戲班的南方政府特務“沈玉茹”。
1996年5月2日，與黃秋生、黃子華、李婉華等共同主演的喜劇電影《金裝香蕉俱樂部》上映；6月19日，發行了粵語專輯《熱·敏》，該專輯由周慧敏親自擔任監制；10月8日，推出普通話專輯《時間》，該專輯包括同名主打歌在内的10首歌曲。
1997年下半年，周慧敏先後在美國大西洋城和拉斯維加斯各舉行了一場告别演唱會，随後她宣布退出娛樂圈。2005年5月，周慧敏為寵物貓撰寫的成長日記《我的貓兒子周慧豹》出版。
2006年5月26日，周慧敏在香港紅館舉行了複出演唱會——“周慧敏Back For Love演唱會”；7月11日，應古巨基邀請，周慧敏在由對方執導的MV《愛得太遲》中擔任女主角，并與古巨基合唱了歌曲《愛得太遲》，該曲目在2006香港新城勁爆頒獎典禮上獲得了新城勁爆卡拉OK歌曲獎。
2010年8月26日，與吳君如領銜主演的愛情電影《得閑炒飯》上映，她在片中飾演因一夜情懷孕的銀行職員“Anita”。
2011年3月19日，為慶祝入行25周年，周慧敏在香港紅館舉行“Deep V.25演唱會”；3月28日，推出EP專輯《盆栽》；11月4日，周慧敏獲得了“十大傑出衣着人士”獎。
2012年3月24日，周慧敏現身黃凱芹“true colors 25周年”演唱會擔任嘉賓；5月19日，周慧敏在澳門金光綜藝館舉行“Journey Of Love周慧敏世界巡回演唱會”；10月27日，“Journey Of Love周慧敏世界巡回演唱會”廣州站開幕。
2014年8月15日，與宋芸桦、賴雅妍、藍心湄等聯袂主演的愛情喜劇片《等一個人咖啡》上映，周慧敏在片中扮演美麗優雅，不食人間煙火的老闆娘；12月18日，推出個人首張福音專輯《HIM》，專輯收錄了10首歌曲，都由周慧敏親自監制、創作。
2015年3月21，應林以諾牧師邀請，周慧敏參加了“Yeah Show2015音樂布道會”，并演唱了福音歌曲《肋骨》。2017年1月28日，周慧敏參加了2017江蘇衛視春節聯歡晚會，與古巨基合唱了歌曲《許願》。2018年1月26日，為慶祝入行30周年，周慧敏在香港紅館舉行“一萬天荒愛未老·周慧敏30周年演唱會”。2019年8月10日，“一萬天荒愛未老·周慧敏30周年演唱會”台北站開唱；11月9日，“一萬天荒愛未老·周慧敏30周年演唱會”南甯站開唱。
個人生活父母
周慧敏是個遺腹子，她父親在她出生前就因心髒病去世了，她是與母親相依為命長大的。2015年9月，其母在睡夢中安詳過世，享壽91歲。
感情
1986年，周慧敏與Radiers樂隊的主唱陳德彰相戀。1991年，陳德彰對外宣布已和周慧敏分手。
1989年，周慧敏與媒體人倪震因參加節目而相識，後來聯系漸多發展為戀人關系。1993年，兩人協議分手。1996年兩人複合。1997年，周慧敏宣布退出娛樂圈，和倪震移居加拿大溫哥華。2004年，兩人返回香港定居。2008年12月7日淩晨，香港媒體在中環的一家酒吧内拍到了倪震和一個年輕女孩的熱吻照片；12月11日，周慧敏與倪震同時電告香港各大媒體，宣布分手，“做回朋友”；12月18日，倪震發表聲明，宣布已和周慧敏注冊結婚。2009年1月5日，兩人舉辦婚宴。
愛好
周慧敏于1997年淡出娛樂圈後學會了理發，并醉心于畫畫，寫作及美式台球，她是香港美式台球協會會員，曾經代表出賽奪取女子組第三名。2001年，在水溶劑繪畫展中，周慧敏以畫作《新疆老翁》獲得了“視藝新紀元獎”。
宗教
周慧敏于2009年開始參加教會禮拜，并于2010年複活節受洗成為基督徒。
寵物
2003年，當時還是戀人的倪震買回了一隻豹貓，周慧敏視其為“兒子”，并取名周慧豹。
主要作品音樂專輯音樂單曲演唱會記錄參演電視劇參演電影
音樂單曲演唱會記錄參演電視劇參演電影
參演電視劇參演電影
主持節目出版書籍
雜志寫真社會活動
2000年2月13日，周慧敏參與“保護遺棄動物協會”募捐活動，市民付出40元便可跟她合照、簽名及握手等。
2003年，周慧敏應邀擔任保護非煙民協會的首任大使，并撰寫公開信給香港特首董建華要求正視二手煙對非煙民之毒害。
2004年5月13日，周慧敏帶了大量貓狗的食物，駕車到元朗的保護遺棄動物協會，探望一群被收留的流浪貓、狗。
2005年1月6日，作為“無煙工作間領先企業大使”的周慧敏，擔任“全港無煙工作間領先大獎”頒獎禮頒獎嘉賓，并提倡政府應該實施食肆全面禁煙；9月24日，受邀擔任保良局“地區安老服務”開幕嘉賓 ；11月26日，出席在奧海城舉行的“奧海城童聲童話丹麥聖誕亮燈夜”活動；同年，将《我的貓兒子周慧豹》一書的版稅全數捐給SAA作營運基金之用，并為SAA作探訪宣傳活動。
2006年2月18日，出席某品牌“一瞬一生成就美麗慈善化妝馬拉松”活動；5月25日到27日，周慧敏連續舉行了三場題為“BACK FOR LOVE”的演唱會，目的是給“香港非牟利獸醫診所”的建立籌款，演唱會後，她捐出了150萬元的全部所得；10月12日，周慧敏應邀擔任香港癌症基金會的粉紅大使，并出席香港癌症基金會粉紅革命活動，呼籲婦女應明白及早發現乳癌的重要性；11月30日，出席又一城的聖誕樹亮燈儀式，并拍賣鑲有2千粒水晶石的蝴蝶結，所得的善款捐贈給“願望成真基金”，幫助患重病的兒童達成願望。
2007年5月，周慧敏跟随一個慈善團體探訪全球最貧困的國家之一的老撾，還參與“助養兒童計劃”，成為當地三位兒童的“母親”；7月22日，出席某品牌“慈善化妝馬拉松”活動，周慧敏即席替兩位長者化妝打扮，又自掏腰包捐出五百元，買兩盒朱古力籌款；10月14日，周慧敏以“粉紅大使”身份出席“粉紅革命”活動，呼籲婦女關注乳房健康。
2008年1月12日，周慧敏以“環保大使”身份出席“計算機回收計劃揭幕日”；2月16日，出席保護遺棄動物協會研讨會；3月1日，參加了在上海舉行的“愛我中華2008新娛樂慈善群星會”，獲頒“2008最具影響力慈善之星”稱号；3月17日，周慧敏以“樂施會中國發展基金”大使身份，前往雲南省祿勸縣之貧窮鄉村作親善探訪；3月，獲控煙辦公室之邀為推廣控煙短片擔任主持工作；5月25日，以樂施大使身份義賣樂施米，為四川地震的災民籌款；6月1日，參與“演藝界512關愛行動”并義唱為四川地震災民籌款；6月7日，以樂施大使身份出席樂施商品開幕禮并捐出私人物品義賣，推動該會扶貧救災工作；10月9日，周慧敏出席“粉紅革命”記者會；11月9日，出席某化妝品牌舉辦的慈善義賣活動，善款捐贈給UNICEF中國女童教育基金；11月13日，以“中國愛滋病防治行動關愛大使”身份出席“童心同行愛之夜”記者招待會；11月29日，以“苗圃行動愛心大使”身份出席“愛心湯罐設計比賽”頒獎典禮，代表苗圃行動接收10萬5千元善款， 作為重建四川之用；11月，黎明的慈善演唱會在香港舉行，周慧敏作為特别嘉賓出席 。
2009年2月3日，以“饑馑助養大使”身份出席“饑馑三十2009”記者會，之後到尼泊爾探訪5天并助養四名孩子；10月7日，周慧敏在香港以“粉紅大使”身份出席香港癌症基金會的“粉紅革命”活動，提醒婦女及早發現乳癌的重要；11月8日，2009年東亞運動會期間，周慧敏以願望成真基金大使身份出席“首屆單車慈善車路挑戰賽”頒獎禮；12月26日，出席電影《秋田犬八千》的宣傳活動，以宣傳非牟利獸醫診所。
2010年3月3日，以中國艾滋病防治行動關愛大使身份出席活動；3月25日，以“艾滋病關愛大使”的身份，與中國艾滋病防治行動香港委員會聯席主席梁智鴻、副主席李麗娟等人前往甘肅清水縣金集鎮主持了中國艾滋病防治行動香港委員會援建的金集鎮中心衛生院住院大樓落成典禮，并探訪了一些受艾滋病影響的家庭；4月25日，獲得了“2009真維斯娛樂大典”慈善類·年度慈善人物獎；4月26日，參加在香港紅館舉行的赈災彙演晚會，為青海玉樹地震籌款。
2011年3月，周慧敏将EP《盆栽》和海報義賣的收益，扣除成本後捐給日本地震及海嘯災民；3月26日晚，周慧敏亮相上海某會館，為當晚舉行的開業典禮暨關注日本、雲南災區慈善晚會助力，并拿出了自己從藝25周年演唱會麥克風和随身佩帶腕表進行拍賣，分别拍得10萬元及20萬元善款。中國愛心工作委員會主席龍宇翔為周慧敏頒發了年度愛心大使獎；5月7日，出席“鄭兆良與十字路口籌款晚會”；10月初，周慧敏在聞悉東非遭遇60年來最嚴峻的糧荒，受災人數逾千萬，當中還包括逾200萬名脆弱的兒童後，與鄭秀文拍攝短片，呼籲大衆關注這次糧荒；11月7日晚，以宣明會助養者身分主持“星光花園聖誕燈飾彙演”亮燈儀式；11月30日，出席香港愛滋病基金會20周年慈善暨感恩晚宴，現場還特别演唱歌曲為基金會籌款。
2012年8月2日，為宣明會主辦的“舊書回收義賣大行動2012”開幕禮擔任主禮嘉賓，并現場捐出個人著作《我的貓兒子周慧豹》，呼籲買書籌款助陝西學童興建學校。
2013年6月13日，應邀出席某慈善籌款晚宴活動。2015年9月28日，周慧敏出席“60年代的光芒A Go Go Dance慈善演唱會”。
獲獎記錄
人物評價
她不僅是美女，更是才情與美貌匹敵的才女。她的形象是20世紀九十年代香港男人心中一個清純的夢，盈盈美眸，柔柔長發，聲若莺燕，無論從哪個角度看都完美無缺。（時光網評）
周慧敏溫文優雅的形象及清新脫俗的氣質一直深入民心，被外界诩以“玉女掌門人”的稱号。（金羊網-羊城晚報評）
在電視劇《刀馬旦》中，周慧敏飾演的沈菊仙有着不俗的扮相，能感到清麗美感。（澎湃新聞評）
