簡介
自然界存在多種多樣病菌，如何将這些病菌加以鑒别、分類，并選擇有效藥物進行治療這是很重要的問題。革蘭氏染色法，能夠把細菌分為兩大類：采用這種染色方法，是先用龍膽紫（亦稱結晶紫）來染病菌，所有細菌都染成了紫色，然後再塗以革蘭氏碘液，來加強染料與菌體的結合，再用95％的酒精來脫色20～30秒鐘，有些細菌不被脫色，仍保留紫色，有些細菌被脫色變成無色，最後再用複紅或沙黃複染1分鐘，結果已被脫色的細菌被染成紅色，未脫色的細菌仍然保持紫色，不再着色，這樣，凡被染成紫色的細菌稱為革蘭氏陽性菌；染成紅色的稱為革蘭氏陰性菌。
常見種類
常見的革蘭氏陽性菌有：葡萄球菌（Staphylococcus）、鍊球菌(Streptococcus)、肺炎雙球菌、炭疽杆菌、白喉杆菌、破傷風杆菌等；常見的革蘭氏陰性菌有痢疾杆菌、傷寒杆菌、變形杆菌、及霍亂弧菌等。
在治療上，大多數革蘭氏陽性菌都對青黴素敏感（結核杆菌對青黴素不敏感）；而革蘭氏陰性菌則對青黴素不敏感（但奈瑟氏菌中的流行性腦膜炎雙球菌和淋病雙球菌對青黴素敏感），而對鍊黴素、氯黴素等敏感。所以首先區分病原菌是革蘭氏陽性菌還是陰性菌，在選擇抗生素方面意義重大。
結構特點
革蘭氏陽性菌細胞壁較厚，約20～80nm。肽聚糖含量豐富，有15～50層，每層厚度1nm,約占細胞幹重的50～80%。此外，尚有大量特殊組份磷壁酸(teichoic acid)。磷壁酸是由核糖醇(ribitol)或甘油(glyocerol)殘基經由磷酸二鍵互相連接而成的多聚物。磷壁酸分壁磷壁酸(wall teichoic acid)和膜磷壁酸(membrane teichoic acid)兩種，前者和細胞壁中肽聚糖的n-乙酰胞壁酸連結，膜磷壁酸又稱脂磷壁酸(lipteichoic acid)和細胞膜連結，另一端均遊離于細胞壁外。
革蘭氏陽性菌和革蘭氏陰性菌的細胞壁結構顯着不同，導緻這兩類細菌在染色性、抗原性、毒性、對某些藥物的敏感性等方面的很大差異。革蘭氏染色的結果取決于細菌細胞壁的結構即革蘭氏染色原理為：G﹢菌：細胞壁厚，肽聚糖網狀分子形成一種透性障，當乙醇脫色時，肽聚糖脫水而孔障縮小，故保留結晶紫-碘複合物在細胞膜上。
原理學說
等電點學說
革蘭氏陽性菌的等電點在pH2-3，比陰性菌（pH4-5）低，加之碘為弱氧化劑，可降低革蘭氏陽性菌的等電點，緻使兩類菌的等電點差異擴大，因此陽性菌和堿性染料的結合力比陰性菌更強。
化學學說
碘液在菌體内與結晶紫結合後又和菌體内核糖核酸鎂鹽-蛋白質複合物結合，此結合物不易被丙酮酒精脫掉，呈革蘭氏染色陽性。因革蘭氏陰性菌缺乏核糖核酸鎂鹽，故對碘與結晶紫結合物攝取少，且不牢固，易被丙酮酒精脫色而呈革蘭氏染色陰性。
滲透學說
乙醇使陽性菌所含粘肽多糖脫水而緻細胞壁間隙縮小，通透性降低，在菌體内保留了染料-碘複合物，呈紫色。陰性菌含粘肽少，細胞壁變化不大，通透性不受影響，菌體内的染料-碘複合物較易透出，失去紫色，被複染成為紅色。
意義
革蘭氏染色法的意義就在于鑒别細菌，把衆多的細菌分為兩大類，革蘭氏陽性菌和革蘭氏陰性菌。大多數化膿性球菌都屬于革蘭氏氏陽性菌，它們能産生外毒素使人緻病，而大多數腸道菌多屬于革蘭氏陰性菌，它們産生内毒素，靠内毒素使人緻病。
