組成
完整的ELISA試劑盒包含以下各組分:
(1)已包被抗原或抗體的固相載體(免疫吸附劑);
(2)酶标記的抗原或抗體(結合物);
(3)酶的底物;
(4)陰性對照品和陽性對照品(定性測定中),參考标準品和控制血清(定量測定中);
(5)結合物及标本的稀釋液;
(6)洗滌液,在闆式ELISA中,常用的稀釋液為含0.05%吐溫20磷酸緩沖鹽水;
(7)酶反應終止液,常用的HRP反應終止液為硫酸,其濃度按加量及比色液的最終體積而異,在闆式ELISA中一般采用3mol/L。
分類
核酸提取純化類
1.磁珠法核酸提取試劑盒
2.磁珠法提取DNA試劑盒
3.DNA提取試劑盒(離心柱法)
4.磁珠法RNA提取試劑盒
5.RNA提取試劑盒(離心柱法)
6.磁珠法植物基因組DNA提取試劑盒
7.反轉錄試劑盒
8.膠回收試劑盒
9.PCR純化試劑盒
10.病毒核酸提取試劑盒(磁珠法)
11.土壤基因組DNA提取試劑盒
12.法醫樣本DNA提取試劑盒(磁珠法)等
蛋白檢測類
1.elisa
常見elisa試劑盒有:
特種蛋白檢測elisa試劑盒
如免疫球蛋白,抗鍊O-aso,類風濕因子RF,C反應蛋白,微量白蛋白,β-2微球蛋白human,鐵蛋白,轉鐵蛋白transferrin等等
腫瘤标志物檢測elisa試劑盒:
如腫瘤标志物,組織多肽抗原,腫瘤相關因子,胰腺癌,直腸癌,細胞角蛋白片段,胃腸癌,鐵蛋白,糖鍊抗原,神經特異性稀醇化酶,上皮膜抗原,乳腺癌,人抗小鼠抗體,前列腺,甲胎蛋白,肝癌,甲基苯丙胺,大腸癌,肺癌,大小便隐血檢測,癌胚抗原,β-2微球蛋白等等。
食品安全檢驗elisa試劑盒:
食品中的激素、藥物、黴菌毒素、過敏原殘留、轉基因産品的檢測試劑盒,以及微生物、維生素等的檢測産品。
植物病毒、細菌、真菌、植物激素和轉基因作物的農業診斷試劑盒
動植物疾病診斷類如豬、牛、羊、馬等家畜和禽類以及寵物類檢測試劑盒
傳染病檢測elisa試劑盒
如幽門螺杆菌,乙腦,乙肝,丙肝,丁肝,戊肝,庚肝,衣原體,性病,腺病毒,微小病毒B19,天疱瘡,水痘-帶狀疱疹病毒,生殖支原體,傷寒,沙眼,腮腺炎,人型支原體,麻疹,輪狀病毒,流行性出血熱,淋球菌,萊姆病,柯薩奇,抗解尿支原體,軍團菌,結核,膠原,尖銳濕疣,甲肝,脊髓灰質炎,急性胰腺炎尿胰蛋白酶,霍亂,呼吸道合胞病毒,肝吸蟲,副流感,肺炎,帶狀疱疹,傳染性單核細胞增多症,層粘蛋白,布魯氏杆菌,百日咳,白喉,艾柯病毒,EB病毒,A族鍊球菌等等。
2.免疫共沉澱試劑盒
3.化學發光試劑盒
4.免疫組化試劑盒
5.放射免疫試劑盒
6.免疫熒光試劑盒
其它
1.細胞凋亡試劑盒
2.葡萄糖檢測試劑盒
3.支原體檢測試劑盒
四、試劑盒使用示例
試劑盒的産生正是為了使實驗人員能夠擺脫繁重的試劑配制及優化過程,所以試劑盒中一般配備有相應的使用說明書,用戶按照說明書不需或隻需少量的優化即可得到滿意的結果。
⑴試劑盒使用說明書
說明書一般包括公司标志及名稱、試劑盒名稱、試劑盒組成、保質期、使用領域、使用方法等項目
說明書格式如右圖所示:
①一般在頁眉頁腳處為公司的名稱及标志;
②接下來為試劑盒的名稱;
③試劑盒組成中應為試劑盒中的所有内容,為了簡潔明了,一般以表格的形式表現;
④操作步驟是試劑盒說明書中最重要的部分,内容應準确、簡潔、易懂,不能包含帶有歧義的句子,更不能含糊其辭,排版上操作步驟應将複雜的步驟拆解,使人一目了然。可以說操作步驟為試劑盒的靈魂。
RNA
試劑盒内容(以離心柱型為例):
一般包括:裂解液RL
去蛋白液RW1
漂洗液RW
RNase free ddH2O
吸附柱(RNase free)
過濾柱(RNase free)
緩沖液
離心管(RNase free)
收集管(RNase free)
此外,還配有一份試劑盒使用說明書,根據不同的生産商,可能還配有不同的試劑,如:DNA酶、溶菌酶等。
使用時一定要根據自己的實驗需要購買專用提取試劑盒,如果不是專用試劑盒,或許能提出RNA,但不能确保其質量以及完整性,會影響RT-PCR、Northern blot、Dot blot、Real time RT PCR、芯片分析、polyA 篩選、體外翻譯、RNase保護分析、分子克隆等後續實驗的結果。
當前提取效果好的是QIANGEN公司生産的RNA提取試劑盒,但其售價較高,單次實驗費用花費太大,對精度要求不高的實驗沒有必要購買,當然還有其它的進口試劑盒,但是均存在價格高、訂貨周期長的問題(如果碰上國内無貨的時候,要從國外發貨,會等很長一段時間)。普通的提取實驗用國産的試劑盒就足以,價格不高,基本上各地均有現貨,如天根(目前國内生産的試劑盒中銷售面比較廣的一種)等,其價格比進口試劑盒要便宜許多,且效果還不錯,性價比還可以。
當然,就RNA的提取而言,不一定試劑盒的提取效果就非常好,其實采用一些經典的RNA提取方法,效果也很不錯,如:TRIZOL、EDTA等,隻是試劑盒使用方便,經典的方法操作複雜一些。