基本介绍
免疫印迹是一个用于蛋白质分析的常规技术,在电场的作用下将电泳分离的蛋白从凝胶转移至一种固相支持物,然后利用抗原-抗体的特异性反应,从蛋白混合物中检测出目标蛋白,从而定量或定性的确定正常或实验条件下细胞或组织中目标蛋白的表达情况。可以同时比较多个样品同种蛋白的表达量差异。
基本原理
将混合抗原样品在凝胶板上进行单向或双向电泳分离,然后取固定化基质膜与凝胶相贴。在印迹纸的自然吸附力、电场力或其它外力作用下,使凝胶中的单一抗原组份转移到印迹纸上,并且固相化。最后应用免疫复盖液技术如免疫同位素探针或免疫酶探针等,对抗原固定化基质膜进行检测和分析。
优点
免疫印迹法是一项分析抗原、抗体的技术。它具有下列优点:
1、湿的固定化基质膜柔韧,易于操作;
2、固定化的生物大分子可均一的与各种免疫探针接近,不会象凝胶那样受孔径阻隔;
3、免疫印迹分析只需少量试剂;
4、孵育、洗涤的时间明显减短;
5、可同时制作多个拷贝,用于多种分析和鉴定;
6、结果以图谱形式可长期保存;
7、免疫探针可通过降低PH值等方法,象抹去录音磁带一样将探针抹掉,再换用第二探针进行分析检测。免疫印迹法的应用范围及优点不仅局限于此,它必将随着这一方法的深入研究而不断发展和完善。