基本概述
原理
分子的紫外可見吸收光譜是由于分子中的某些基團吸收了紫外可見輻射光後，發生了電子能級躍遷而産生的吸收光譜。由于各種物質具有各自不同的分子、原子和不同的分子空間結構，其吸收光能量的情況也就不會相同，因此，每種物質就有其特有的、固定的吸收光譜曲線，可根據吸收光譜上的某些特征波長處的吸光度的高低判别或測定該物質的含量，這就是分光光度定性和定量分析的基礎。
分光光度分析就是根據物質的吸收光譜研究物質的成分、結構和物質間相互作用的有效手段。它是帶狀光譜，反映了分子中某些基團的信息。可以用标準光圖譜再結合其它手段進行定性分析。
根據Lambert-Beer定律說明光的吸收與吸收層厚度成正比，比耳定律說明光的吸收與溶液濃度成正比；如果同時考慮吸收層厚度和溶液濃度對光吸收率的影響，即得朗伯-比耳定律。即A=εbc，(A為吸光度，ε為摩爾吸光系數，b為液池厚度，c為溶液濃度)就可以對溶液進行定量分析。
将分析樣品和标準樣品以相同濃度配制在同一溶劑中，在同一條件下分别測定紫外可見吸收光譜。若兩者是同一物質，則兩者的光譜圖應完全一緻。如果沒有标樣，也可以和現成的标準譜圖對照進行比較。這種方法要求儀器準确，精密度高，且測定條件要相同。
實驗證明，不同的極性溶劑産生氫鍵的強度也不同，這可以利用紫外光譜來判斷化合物在不同溶劑中氫鍵強度，以确定選擇哪一種溶劑。
詳細參數
優良的光學系統，先進的電子學系統，保證了0.015[%]T的低雜散光；采用進口全息光栅，實現了低雜散光；單光束掃描式基線記憶系統，基線記憶分辨率0.1nm雙光束動态反饋比例記錄測光系統保證了基線穩定性；最快掃描速度800nm/分，可記憶全波長範圍基線。LCD大屏幕顯示、輕觸式按鍵，外觀新穎操作方便。
儀器自檢系統，可以檢驗各執行部件的到位動作狀态，并可将結構告知用戶。計算機及打印機輸出系統：定波長測試T，A，C掃描間隔0.1、0.2、0.5、1、2、5nm掃描速度高、中、低三級掃描區間任意輸入軟件可在線升級豐富的定量分析軟件和光譜掃描及處理軟件；有蠕動進樣器、超微量池架、恒溫池架、光學積分球、鏡面反射、光纖附件和比色皿系列等大量用戶可選專用附件，使儀器的應用範圍大大擴展。
軟件作用詳細介紹光譜掃描：A：掃描間隔：0.1、0.2、0.5、1.0、2.0、5.0nmB：掃描區間可任意輸入C：高、中、低三檔掃描速度可自選D：坐标參數、掃描次數、T/A/E模式皆可自選E：有尋找波峰、谷作用
動力學測試：A：最小采樣間隔0.5秒，最大運行時間9小時B：可設定延時時間、運行時間、采樣時間間隔C：T/A模式轉換
多波長測試：A：測試波長多達10個B：測試樣品3-8個
建立标準曲線、定量測試：A：單波長法、等吸收點雙波長法和三點法B：可做一階過零、不過零線性回歸和二階、三階曲線拟合
DNA/Protein測試：A：可手動、自動測試，測試波長缺省值為260nm、280nm和320nm，也可修改B：可計算DNA、Protein和Ratio比率
其它附屬作用：A：波長校準B：光度精度複核C：波長精度複核D：能量最大點尋找（用于微量測試）
應用信息
在水和廢水監測中的應用，對于一個水系的監測分析和綜合評價，一般包括水相（溶液本身）、固相（懸浮物、底質）、生物相（水生生物）。在水質的常規監測中，紫外可見分光光度法占有較大的比重。由于水和廢水的成分複雜多變，待測物的濃度和幹擾物的濃度差别很大，在具體分析時必須選擇好分析方法。
在農産品和食品分析中可用于檢測的組分或成分有蛋白質、賴氨酸、葡萄糖、維生素C、硝酸鹽、亞硝酸鹽、砷、汞等;
在植物生化分析中可用于檢測葉綠素、全氮和酶的活力等；
在飼料分析中可用于檢測煙酸、棉酚、磷化氫和甲酯等。
日常維護
要懂得分析儀器的日常維護和對主要技術指标的簡易測試方法，經常對儀器進行維護和測試，以保證儀器工作在最佳狀态。
一、溫度和濕度是影響儀器性能的重要因素。他們可以引起機械部件的鏽蝕，使金屬鏡面的光潔度下降，引起儀器機械部分的誤差或性能下降；造成光學部件如光栅、反射鏡、聚焦鏡等的鋁膜鏽蝕，産生光能不足、雜散光、噪聲等，甚至儀器停止工作，從而影響儀器壽命。維護保養時應定期加以校正。應具備四季恒濕的儀器室，配置恒溫設備，特别是地處南方地區的實驗室。
二、環境中的塵埃和腐蝕性氣體也會影響機械系統的靈活性、降低各種限位開關、按鍵、光電偶合器的可靠性，也是造成必須學部件鋁膜鏽蝕的原因之一。因此必須定期清潔，保障環境和儀器室内衛生條件，防塵等。
三、儀器使用一定周期後，内部會積累一定量的塵埃，最好由維修工程師或在工程師指導下定期開啟儀器外罩對内部進行除塵工作，同時将各發熱元件的散熱器重新緊固，對光學盒的密封窗口進行清潔，必要時對光路進行校準，對機械部分進行清潔和必要的潤滑，最後，恢複原狀，再進行一些必要的檢測、調校與記錄。
注意事項和問題處理
1.開機前将樣品室内的幹燥劑取出，儀器自檢過程中禁止打開樣品室蓋。
2.比色皿内溶液以皿高的2/3～4/5為宜，不可過滿以防液體溢出腐蝕儀器。測定時應保持比色皿清潔，池壁上液滴應用擦鏡紙擦幹，切勿用手捏透光面。測定紫外波長時，需選用石英比色皿。
3.測定時，禁止将試劑或液體物質放在儀器的表面上，如有溶液溢出或其它原因将樣品槽弄髒，要盡可能及時清理幹淨。
4.實驗結束後将比色皿中的溶液倒盡，然後用蒸餾水或有機溶劑沖洗比色皿至幹淨，倒立晾幹。關電源将幹燥劑放入樣品室内，蓋上防塵罩，做好使用登記，得到管理老師認可方可離開。
紫外可見分光光度計問題處理：
1、如果儀器不能初始化，關機重啟。
2、如果吸收值異常，依次檢查：波長設置是否正确（重新調整波長，并重新調零）、測量時是否調零（如被誤操作，重新調零）、比色皿是否用錯（測定紫外波段時，要用石英比色皿）、樣品準備是否有誤（如有誤，重新準備樣品）。
