方式
劃線的形式有多種,可将一個平闆分成四個不同面積的小區進行劃線,第一區(A區)面積最小,作為待分離菌的菌源區,第二和第三區(B、C區)是逐級稀釋的過渡區,第四區(D區),則是關鍵區,使該區出現大量的單菌落以供挑選純種用。為了得到較多的典型單菌落,平闆上四區面積的分配應是D>C>B>A。
目的
用接種環在平闆培養基表面通過分區劃線而達到純化分離微生物的一種方法。是将微生物樣品在固體培養基表面多次作“由點到線”稀釋而達到分離的目的。用于目的微生物的分離,便于得到目的性狀的單克隆,大腸杆菌、枯草芽孢杆菌混合菌懸液,無菌培養皿,水浴鍋,接種環等。
示例
1.融化培養基:牛肉膏蛋白胨瓊脂培養基放入水浴中加熱至融化。2.倒平闆:待培養基冷卻至50℃左右,按無菌操作法倒2隻平闆(每皿約15m1),平置,待凝固。倒平闆的方法:右手持盛培養基的試管或三角瓶置火焰旁邊,用左手将試管塞或瓶塞輕輕地撥出,試管或瓶口保持對着火焰;然後用右手手掌邊緣或小指與無名指夾住管(瓶)塞(也可将試管塞或瓶塞放在左手邊緣或小指與無名指之間夾住。如果試管内或三角瓶内的培養基一次用完,管塞或瓶塞則不必夾在手中)。左手拿培養皿并将皿蓋在火焰附近打開一縫,迅速例入培養基約15m1,加蓋後輕輕搖動培養皿,使培養基均勻分布在培養皿底部,然後平置于桌面上,待凝後即為平闆。