基本概述
原理
分子的紫外可见吸收光谱是由于分子中的某些基团吸收了紫外可见辐射光后，发生了电子能级跃迁而产生的吸收光谱。由于各种物质具有各自不同的分子、原子和不同的分子空间结构，其吸收光能量的情况也就不会相同，因此，每种物质就有其特有的、固定的吸收光谱曲线，可根据吸收光谱上的某些特征波长处的吸光度的高低判别或测定该物质的含量，这就是分光光度定性和定量分析的基础。
分光光度分析就是根据物质的吸收光谱研究物质的成分、结构和物质间相互作用的有效手段。它是带状光谱，反映了分子中某些基团的信息。可以用标准光图谱再结合其它手段进行定性分析。
根据Lambert-Beer定律说明光的吸收与吸收层厚度成正比，比耳定律说明光的吸收与溶液浓度成正比；如果同时考虑吸收层厚度和溶液浓度对光吸收率的影响，即得朗伯-比耳定律。即A=εbc，(A为吸光度，ε为摩尔吸光系数，b为液池厚度，c为溶液浓度)就可以对溶液进行定量分析。
将分析样品和标准样品以相同浓度配制在同一溶剂中，在同一条件下分别测定紫外可见吸收光谱。若两者是同一物质，则两者的光谱图应完全一致。如果没有标样，也可以和现成的标准谱图对照进行比较。这种方法要求仪器准确，精密度高，且测定条件要相同。
实验证明，不同的极性溶剂产生氢键的强度也不同，这可以利用紫外光谱来判断化合物在不同溶剂中氢键强度，以确定选择哪一种溶剂。
详细参数
优良的光学系统，先进的电子学系统，保证了0.015[%]T的低杂散光；采用进口全息光栅，实现了低杂散光；单光束扫描式基线记忆系统，基线记忆分辨率0.1nm双光束动态反馈比例记录测光系统保证了基线稳定性；最快扫描速度800nm/分，可记忆全波长范围基线。LCD大屏幕显示、轻触式按键，外观新颖操作方便。
仪器自检系统，可以检验各执行部件的到位动作状态，并可将结构告知用户。计算机及打印机输出系统：定波长测试T，A，C扫描间隔0.1、0.2、0.5、1、2、5nm扫描速度高、中、低三级扫描区间任意输入软件可在线升级丰富的定量分析软件和光谱扫描及处理软件；有蠕动进样器、超微量池架、恒温池架、光学积分球、镜面反射、光纤附件和比色皿系列等大量用户可选专用附件，使仪器的应用范围大大扩展。
软件作用详细介绍光谱扫描：A：扫描间隔：0.1、0.2、0.5、1.0、2.0、5.0nmB：扫描区间可任意输入C：高、中、低三档扫描速度可自选D：坐标参数、扫描次数、T/A/E模式皆可自选E：有寻找波峰、谷作用
动力学测试：A：最小采样间隔0.5秒，最大运行时间9小时B：可设定延时时间、运行时间、采样时间间隔C：T/A模式转换
多波长测试：A：测试波长多达10个B：测试样品3-8个
建立标准曲线、定量测试：A：单波长法、等吸收点双波长法和三点法B：可做一阶过零、不过零线性回归和二阶、三阶曲线拟合
DNA/Protein测试：A：可手动、自动测试，测试波长缺省值为260nm、280nm和320nm，也可修改B：可计算DNA、Protein和Ratio比率
其它附属作用：A：波长校准B：光度精度复核C：波长精度复核D：能量最大点寻找（用于微量测试）
应用信息
在水和废水监测中的应用，对于一个水系的监测分析和综合评价，一般包括水相（溶液本身）、固相（悬浮物、底质）、生物相（水生生物）。在水质的常规监测中，紫外可见分光光度法占有较大的比重。由于水和废水的成分复杂多变，待测物的浓度和干扰物的浓度差别很大，在具体分析时必须选择好分析方法。
在农产品和食品分析中可用于检测的组分或成分有蛋白质、赖氨酸、葡萄糖、维生素C、硝酸盐、亚硝酸盐、砷、汞等;
在植物生化分析中可用于检测叶绿素、全氮和酶的活力等；
在饲料分析中可用于检测烟酸、棉酚、磷化氢和甲酯等。
日常维护
要懂得分析仪器的日常维护和对主要技术指标的简易测试方法，经常对仪器进行维护和测试，以保证仪器工作在最佳状态。
一、温度和湿度是影响仪器性能的重要因素。他们可以引起机械部件的锈蚀，使金属镜面的光洁度下降，引起仪器机械部分的误差或性能下降；造成光学部件如光栅、反射镜、聚焦镜等的铝膜锈蚀，产生光能不足、杂散光、噪声等，甚至仪器停止工作，从而影响仪器寿命。维护保养时应定期加以校正。应具备四季恒湿的仪器室，配置恒温设备，特别是地处南方地区的实验室。
二、环境中的尘埃和腐蚀性气体也会影响机械系统的灵活性、降低各种限位开关、按键、光电偶合器的可靠性，也是造成必须学部件铝膜锈蚀的原因之一。因此必须定期清洁，保障环境和仪器室内卫生条件，防尘等。
三、仪器使用一定周期后，内部会积累一定量的尘埃，最好由维修工程师或在工程师指导下定期开启仪器外罩对内部进行除尘工作，同时将各发热元件的散热器重新紧固，对光学盒的密封窗口进行清洁，必要时对光路进行校准，对机械部分进行清洁和必要的润滑，最后，恢复原状，再进行一些必要的检测、调校与记录。
注意事项和问题处理
1.开机前将样品室内的干燥剂取出，仪器自检过程中禁止打开样品室盖。
2.比色皿内溶液以皿高的2/3～4/5为宜，不可过满以防液体溢出腐蚀仪器。测定时应保持比色皿清洁，池壁上液滴应用擦镜纸擦干，切勿用手捏透光面。测定紫外波长时，需选用石英比色皿。
3.测定时，禁止将试剂或液体物质放在仪器的表面上，如有溶液溢出或其它原因将样品槽弄脏，要尽可能及时清理干净。
4.实验结束后将比色皿中的溶液倒尽，然后用蒸馏水或有机溶剂冲洗比色皿至干净，倒立晾干。关电源将干燥剂放入样品室内，盖上防尘罩，做好使用登记，得到管理老师认可方可离开。
紫外可见分光光度计问题处理：
1、如果仪器不能初始化，关机重启。
2、如果吸收值异常，依次检查：波长设置是否正确（重新调整波长，并重新调零）、测量时是否调零（如被误操作，重新调零）、比色皿是否用错（测定紫外波段时，要用石英比色皿）、样品准备是否有误（如有误，重新准备样品）。
